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利用PEG分离细胞培养上清外泌体的蛋白质组深度分析

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几乎所有种类的细胞都会分泌外泌体这种纳米级囊泡。这些细胞外囊泡作为天然载体运送生物成分并介导细胞间通讯,已成为研究人员目前研究的热点。但是,目前的分离技术如超速离心法非常不方便,而且依赖于专门的设备。

来自中国科学院的研究人员描述了以聚乙二醇(PEG)为基础的方法,可以从细胞培养上清中简便、成本低廉、有效地分离外泌体。高分辨率电子显微镜清晰可见分离的外泌体聚集体的大小和形态,这是基于PEG沉淀的方法获得的。结合串联质谱分析,由5120个基因编码的6299种蛋白质组被成功地从HeLa细胞培养上清液获得,其中包括在ExoCarta数据库中的100种外泌体标记蛋白的97%的蛋白质,以及一系列中低丰度的细胞因子和生物标志物。此外,研究人员发现与细胞的蛋白质相不同,外泌体蛋白质有着高比例的新切割位点,揭示了外泌体在蛋白质降解中间产物的积累和运输中的潜在作用。

参考文献:Weng Y, Sui Z, Shan Y, Hu Y, Chen Y, Zhang L, Zhang Y. (2016) Effective isolation of exosomes with polyethylene glycol from cell culture supernatant for in-depth proteome profiling. Analyst [Epub ahead of print].

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