类风湿性关节炎 (RA) 是一种常见自身免疫疾病，以滑膜炎性浸润和关节破坏为主要特征。机体炎症反应的异常激活可促进滑膜组织增生，这也提示免疫细胞和滑膜组织间存在未知的相互作用机制。以往研究表明，免疫细胞可通过分泌细胞因子（如TNF-α），对滑膜组织产生影响，影响RA病情进展。外泌体可作为生物标志物的新型来源库和调控物质的运送载体，越来越受到科学家的重视，但是免疫细胞分泌的外泌体在滑膜组织活化和增生中的作用仍有待探索。
近期，苏州大学苏州医学院公共卫生学院武龙飞副教授为第一作者，雷署丰/邓飞艳教授为通讯作者，在Nature子刊Experimental & Molecular Medicine（即时IF：11.2）发表了题为“Identification of novel rheumatoid arthritis-associated MiRNA-204-5p from plasma exosomes”的研究成果 (2022;54:334-345)。原文链接：https://www.nature.com/articles/s12276-022-00751-x
1.血浆外泌体miR-204-5p在RA患者中显著降低。为探索外泌体介导的RA发病机制，研究者通过分离人血浆外泌体，基于miRNA表达芯片分析9名RA患者和9名性别、年龄匹配的对照样本，共检测到206种miRNA。RA患者中，7种miRNA表达显著下调和7种miRNA显著上调。通过两个独立样本，对差异表达外泌体miRNA验证RA患者中外泌体 miR-204-5p 表达下调，且RA 患者中外泌体 miR-204-5p 含量与类风湿因子（RF）、红细胞沉降率 (ESR)和C反应蛋白 (CRP) 呈负相关。
2.T细胞来源外泌体miR-204-5p抑制滑膜细胞增殖。为分析血浆外泌体miRNA的来源，使用抗CD3/28诱导T细胞活化，观察到外泌体miR-204-5p 表达降低，人T淋巴细胞可能作为 RA 血浆外泌体miR-204-5p来源。为确定T淋巴细胞释放外泌体miR-204-5p是否可以被滑膜成纤维细胞吸收，研究者采用PKH67标记Jurkat T细胞释放的外泌体，与人MH7A 滑膜成纤维细胞共培养，发现T 淋巴细胞释放外泌体miR-204-5p能有效地转运至滑膜成纤维细胞中。通过慢病毒颗粒构建miR-204-5p过表达滑膜成纤维细胞发现miR-204-5p 对滑膜成纤维细胞的侵袭、增殖和细胞因子分泌具有明显抑制作用。
3.miR-204-5p过表达显著缓解RA小鼠疾病进展。过表达miR-204-5p慢病毒载体关节内注射到RA小鼠踝关节，与对照组相比，miR-204-5p过表达的小鼠关节肿胀程度和关节炎评分显著降低。Micro-CT表明采用miR-204-5p慢病毒治疗的小鼠骨侵蚀较少，骨组织病理学显示关节组织滑膜细胞增殖减弱。研究人员通过ELISA实验发现注射lenti-204-5p小鼠血清TNF-α表达显着降低。
该研究首次发现免疫细胞释放外泌体在维持关节稳态，缓解 RA 进展中发挥重要作用。研究发现：慢性炎症能够导致免疫细胞释放的外泌体miR-204-5p减少，滑膜成纤维细胞接受的外泌体miR-204-5p减少，其抑制作用减弱，加速了滑膜细胞增殖、侵袭和细胞因子释放，外源添加miR-204-5p可有效缓解RA小鼠疾病进展。这种通过多水平（人群队列、动物模型和细胞）整合研究策略为其它疾病研究提供模板，研究结果有助于阐明 RA 发病机制，为RA的诊断和治疗提供理论依据和治疗策略。研究成果也已经申请了发明专利（专利号：ZL201811100516.8）。
参考文献：
Wu LF, Zhang Q, Mo XB, Lin J, Wu YL, Lu X, He P, Wu J, Guo YF, Wang MJ, Ren WY, Deng HW, Lei SF, Deng FY. Identification of novel rheumatoid arthritis-associated MiRNA-204-5p from plasma exosomes. Exp Mol Med. 2022 Mar;54(3):334-345. doi: 10.1038/s12276-022-00751-x. Epub 2022 Mar 30. PMID: 35354913
