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除了CTC和ctDNA检测,还有哪些肿瘤液体活检技术值得期待?

癌症的诊断主要有通过临床症状、放射学、生化检测、肿瘤组织病理分析,以及越来越受欢迎的分子诊断。肿瘤组织样本的分子分析已经成为一种潜在的癌症分类方法。因为局部组织活检,需要手术从肿瘤样本取样切片,这给患者带来很大的痛苦,也不能频繁进行。因此基于血液的“液体活检”,渐渐取代创伤性的组织活检,被搬上了癌症诊断的舞台,如目前大热的液体活检:基于细胞游离DNA和血液循环肿瘤DNA的检测等。

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年初,液体活检入选MIT Technology Review杂志 2015年度十大突破技术。2015年即将过去,除了ctDNA和CTC检测外,还有哪些液体活检技术值得期待?

1 基于肿瘤血小板的RNA检测技术
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2015年11月,来自阿姆斯特丹自由大学的Myron G在《Cancer cell》发表的一篇文章提出,基于肿瘤血小板(Tumor-educated blood platelets,TEPs)的RNA测序可用于泛癌症分析、癌症类型的区分和肿瘤基因突变诊断。

结果表明,血小板的RNA测序可以区分癌症患者与健康人,其准确率达到96%,也能区分六种原发肿瘤类型,其准确度达到71%,并能识别几种肿瘤中发现的基因改变。领先于其他的液体活检,基于TEPs的RNA测序可以通过查明原发肿瘤的部位对癌症进行精确的诊断。
研究表明血小板在体内肿瘤细胞的转移传播中发挥重要作用。

肿瘤细胞能将(突变的)RNA转入血小板中,响应外部信号时血小板的特定pre-mRNAs发生剪接。TEPs可以检测出血小板所含的肿瘤源性RNA生物标志物,这使其成为具有潜在的癌症诊断功能的诊断方法。在这项研究中,Myron G等描述了血小板mRNA在各种癌症患者和健康人体中分布的情况,并评估基于TEPs的测序能否作为癌症分级和癌症辅助诊断的方法。

Myron G的研究团队,从283名对象身上抽血,分离血小板,提取血小板RNA,扩增RNA随后进行测序。结果显示:基于TEPs的RNA测序能够区分出228名是肿瘤患者(包括局部和转移肿瘤)和55名是健康个体,其准确率达96%。也可以区分6种不同类型的肿瘤,其准确率达到了71%。基于TEPs的RNA测序,使her2阳性,KRAS基因突变,表皮生长因子受体或PIK3CA阳性的肿瘤得以准确区分。结果表明,肿瘤血小板mRNA为泛癌症检测、肿瘤分类和肿瘤突变基因诊断提供了一个有价值的平台,并促进了基于血液的液体活检的发展。

2 基于尿液miRNA表达检测技术

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2015年6月,德国弗莱堡大学医学院研究人员开发出一种通过尿样检测乳腺癌的方法,测定乳腺癌的准确率超过90%。这一方法未来可用于乳腺癌早期诊断和治疗。该成果已申请专利,并被刊登在《BMC癌症》杂志上。

弗莱堡大学医学院妇科的斯蒂克勒教授及其领导的研究小组成功发明了尿样检测法,在尿样中测定微RNA分子浓度的变化。miRNA分子控制细胞中的物质转化,乳腺癌患者的miRNA分子浓度水平与健康人有明显差异,通过对差异水平的检测,就可以确定诊断对象是否患有乳腺癌。

实验组为24名乳腺癌患者,对照组为24名健康人,检测9个与乳腺癌相关的miRNA(miR-21, miR-34a, miR-125b, miR-155, miR-195,miR-200b, miR-200c, miR-375, miR-451)表达量差异。发现四个miRNA在乳腺癌患者和健康人之间有显著差异。该检测的灵敏度和特异性最高都达到91.7%。

尿样检测法的最大优点是只需要几毫升的尿液,不需要采集血样或组织切片,对检查对象来说非常方便且没有痛苦。这一方法还非常适合乳腺癌治疗过程的检查,以及群体性体检。

迄今为止,“液体活检”这种测试可以在循环系统及尿液中检测到癌症细胞基因突变或者肿瘤标志物,在实验室中已经产生了很多令人振奋人心的证据。相信在不久的将来,这些方便快捷、特异、无创或微创的分子生物学检测手段,能为临床肿瘤的早期诊断、监测、预后、用药等带来革命性的变化,从而造福人类健康。

参考文献
Cancer Cell. 2015 Nov 9;28(5):66676. PMID:26525104
BMC Cancer .2015 Mar 28;15:193 PMID:25886191

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